E. D. Mytsa, L.Yu. Kokaeva, S.N. Elansky
Oomicet Phytophthora infestans (Mont) de Bary provoca el tizó tardà, una malaltia perillosa de les patates i els tomàquets. Una de les principals fonts d’inòcul primari P. infestans són estructures reproductives en repòs de parets gruixudes - oospores.
Les oospores híbrides resultants de l’encreuament de soques parentals genèticament diferents contribueixen a un augment de la diversitat genotípica de la població, com a conseqüència del qual s’accelera el procés d’adaptació de soques a noves varietats i fungicides aplicats.
Formació d’ospores P. infestans en el camp es va observar a molts països del món: Rússia (Smirnov et al., 1999), Noruega (Hermansen et al., 2002), Suècia (Strömberg et al., 2001), els Països Baixos (Kessel et al., 2002) i altres regions. Les oospores són capaces de persistir al sòl en un estat viable durant més de 2 anys (Bødker et al., 2006) i causar infeccions de plantes després d’hivernar (Ulanova et al., 2010; Lehtinen et al., 2002).
Anteriorment, es va demostrar que les fulles de les plantes de diferents nivells de l’arbust de la patata presenten diferències de resistència al tizó tardà; augmenta de les fulles inferiors a les superiors. Aquesta tendència no depèn de l'edat de les fulles, l'edat de les plantes o la varietat de patates (Vesper et al., 2003). Al mateix temps, no hem pogut trobar dades sobre les diferències en la intensitat de la formació d’ospores a les fulles de diferents capes de l’arbust de la patata a la literatura. Tanmateix, si existeixen aquestes diferències, s’han de tenir en compte a l’hora de prendre mostres de fulles per a l’anàlisi de la formació d’ospores i a l’hora d’interpretar els resultats obtinguts per altres autors. L’objectiu d’aquest treball era estudiar la formació d’ospores a les fulles separades de diferents capes d’una planta de patata, situades en les mateixes condicions en cambres humides.
Materials i mètodes
Hem utilitzat 5 aïllaments P. infestans diferents tipus d'aparellament aïllats de mostres afectades portades de les regions de Moscou, Ryazan i Leningrad. D’entre ells, es van seleccionar 3 parells de soques de diferents tipus d’aparellament, donant abundants oospores quan es van provar en medi de farina de civada d’agar.
Per a la prova, hem utilitzat plantes de patata lliures de virus de les següents varietats cultivades en un hivernacle (en un substrat de torba): Sandrin primerenc, Zorachka, Uladar, Osiris, Ilyinsky a mitjan començament, Yanka a mitjan temporada
Es van seleccionar fulles simples de diferents nivells de la planta de patata per a l'anàlisi. Es van seleccionar tres fulles del nivell inferior (4 fulles compostes inferiors), tres de la part superior (3-4 fulles compostes a la part superior) i tres fulles del centre de la mata. Es van pesar les fulles simples, es van fotografiar sobre paper de coordenades (per calcular el volum i l’àrea) i, després, es van col·locar cap per avall sobre la superfície d’aigua estèril i es van abocar 25 ml a les plaques de Petri. Després, cada fulla es va infectar amb una gota d’una suspensió mixta d’aïllats de zoosporangia A1 i A2 del tipus d’aparellament. Per a tres fulles recollides de cada nivell, es va utilitzar un inòcul de tres parells diferents d’aïllats. Una fulla es va infectar amb una barreja d’inòcul d’un parell d’aïllats.
Per preparar una suspensió de zoosporangia, es van cultivar aïllats de diferents tipus d'aparellament en medi de civada agar durant 7 dies, després dels quals es va rentar el zoosporangia amb aigua destil·lada estèril. La concentració de l’inòcul va ser de 5-7 zoospores en el camp visual del microscopi a un augment de 80x. Cada fulla es va infectar amb una gota d’una suspensió mixta de tipus d’aparellament aïllats de zoosporangia A1 i A2.
En tots els experiments, es van utilitzar 3 fulles de patata per variant. Després de la incubació durant 20 dies a 18 ° C, cada fulla es va homogeneïtzar en un morter amb 2 ml d’aigua destil·lada. De la suspensió resultant, es van prendre 3 mostres, de les quals es van preparar preparats per a microscòpia.
En cada variant, es van examinar 180 camps visuals, després dels quals es va tornar a calcular el nombre d’ospores per 1 mm2 superfície del full. Es van promediar els resultats del recompte per a cada variant.
Per calcular l’interval de confiança (μ) per a un nivell de significació de 0,05, s’ha utilitzat la següent fórmula
on s és la desviació estàndard, n és el nombre de mesures, t és la constant de la prova t per a un nivell de significació de 0,05. Tots els càlculs es van realitzar a Excel (paquet de Microsoft Office).
Resultats i discussió
La inoculació de fulles recollides de diferents capes d’un arbust de patata i col·locades en les mateixes condicions en cambres humides va revelar diferències en la intensitat de la formació d’ospores. En totes les varietats estudiades, el nombre màxim d’ospores es va formar durant la inoculació de fulles recollides dels nivells mitjà i baix de l’arbust. No es van trobar diferències significatives en la formació d’ospores a les fulles inferiors i mitjanes.
El nombre mínim d’ospores es va formar a les fulles de la capa superior (Fig. 1).
A les fulles dels nivells inferior i mitjà, es va formar el nombre màxim d’ospores a les varietats Sandrin, Ilyinsky, Zorachka, Uladar i Osiris. Es van formar una mica menys intensivament a les fulles de la varietat Yanka. El nombre màxim d’ospores a les fulles del nivell superior es va observar a les fulles de la varietat Uladar, seguit de Zorachka, Osiris, Yanka, Ilyinsky, Sandrin en ordre decreixent; no obstant això, no totes les diferències van ser estadísticament significatives.
Figura: 1. Formació d’ospores a les fulles de diferents capes de l’arbust de la patata. Les inferiors són les fulles dels tres nivells inferiors de la mata, les superiors són de 3-4 fulles complexes de la part superior de la planta, les mitjanes són de la meitat de la mata.
Les barres d'error mostren l'interval de confiança per a un nivell de significació de 0,05.
Al camp, les condicions microclimàtiques també contribueixen a la formació d’ospores a les fulles inferiors i mitjanes de l’arbust: major humitat, reducció de la insolació solar i fluctuacions diàries de la temperatura (Harrison, 1992). La polvorització superior produeix menys pesticides al fons i al centre de l’arbust. Per reduir la formació d’ospores, s’han d’utilitzar tecnologies que permetin administrar amb èxit fungicides a les parts mitja i baixa de l’arbust. Es poden obtenir bons resultats utilitzant polvoritzadors d’aire turbulents i fungicides sistèmics que es poden estendre a les parts no tractades de l’arbust.
Aquest treball va comptar amb el suport de la Russian Science Foundation (projecte núm. 14-50-00029).
L'article es va publicar a la revista "Potato Protection" (núm. 2, 2015)